بررسی مولکولی باکتری همزیست موثر در بیوسنتز پدرین

پدرین یکی از قویترین سمومی است که توسط سوسک پدروس تولید می شود و در اثر تماس با پوست افراد سبب بروز درماتیت خطی می شود. این ترکیب با مهار سنتز پروتئین و dna ، مرگ سلول‎های طبیعی و نیز سلول های غیر طبیعی را به همراه دارد. هدف از این مطالعه استخراج و بررسی فعالیت درماتیتی پدرین از سوسک‎ پدروس فوسیپس، جداسازی باکتری همزیست مرتبط با بیوسنتز پدرین و بررسی مولکولی جدایه تولید کننده پدرین می باشد. سوسک پدروس فوسیپس از شهرستان های بابلسر و قائمشهر، جمع آوری شد و استخراج پدرین انجام شد. برای تایید حضور پدرین در عصاره خام استخراج شده، از کروماتوگرافی لایه نازک استفاده شد. بررسی اثر درماتیتی پدرین استخراج شده، با تماس عصاره به پوست حیوان آزمایشگاهی انجام شد. برای جداسازی باکتری موثر در بیوسنتز پدرین، پیکر له شده سوسک پدروس در محیط کشت انتخابی سودوموناس آگار کشت داده شد. جدایه با بررسی مورفولوژی و تولید پیگمان منتشره سبز رنگ انتخاب شد. تولید پدرین، توسط جدایه در محیط کشت بررسی شد. بررسی مولکولی جدایه mh1 با واکنش زنجیره ای پلیمراز ژن های 16s rdna و ژن pedf انجام شد. نتایج کروماتوگرافی لایه نازک عصاره خام استخراج شده نشان داد لکه ای با 22/0=rf روی کاغذ کروماتوگرافی مربوط به پدرین است. فعالیت درماتیتی پدرین استخراج شده با بروز علائمی مانند تورم، قرمزی و خارش شدید پوست آغاز شد و به تدریج با ترشحات پوستی و نکروز اپیدرمی سطح آسیب دیده همراه بود که موید حضور پدرین می باشد. برای اولین بار باکتری همزیست سوسک پدروس جداسازی شد و mh1 نامگذاری شد. بررسی ویژگی‎های مورفولوژیکی و فیزیولوژیکی جدایه mh1 نشان داد این باکتری متعلق به جنس سودوموناس می‎باشد. بررسی توالی ژن rdna 16s و آنالیز فیلوژنتیک نشان داد، جدایه mh1 با 99 درصد همولوژی متعلق به جنس و گونه سودوموناس آئروژینوزا است. این نتایج ضمن تایید حضور باکتری متعلق به جنس سودوموناس در سوسک پدروس، نشان می دهد باکتری جداشده از سوسک پدروس فوسیپس استان مازندران، می تواند به صورت فعال در شرایط آزمایشگاهی در محیط کشت غنی شده، پدرین تولید کند. تولید پدرین نوید بخش استفاده گسترده از آن در تحقیقات سرطان شناسی و نیز به عنوان داروی ضد سرطان در درمان بیماران است.